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二氢乙锭（Dihydroethidium，DHE），也称为Hydroethidine，是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。DHE本身是一种细胞膜渗透性的蓝色探针（λ Ex/λ Em:370/420nm），一旦进入细胞后与超氧化物阴离子反应，生成2-hydroxyethidium。2-hydroxyethidium插入核酸后产生红色荧光（λ Ex/λ Em:535/610nm），能够被荧光显微镜、流式细胞仪或其他合适仪器检测。作为一种选择性且灵敏的荧光探针，DHE能用来检测吞噬细胞呼吸爆发中的活性氧（ROS）水平，也能用来检测培养细胞中的超氧化物阴离子水平。DHE也能用作活体染料，流式检测中用于完整细胞的成像和功能分析。还能用在各种凋亡模型中观察荧光的增强。另外，DHE也能用于活细胞线粒体超氧化物生成的检测，虽然其结构类似物MitoSOX Red具有更加特异性的线粒体定位能力。通常情况30～40min内能得到均匀标记的细胞。

化学名	5-ethyl-5,6-dihydro-6-phenyl-3,8-phenanthridinediamine，3,8-Diamino-5,6-dihydro-5-ethyl-6- phenylphenanthridine，2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenyl-9,10-dihydrophenanthridine
同义名	Hydroethidine，Hydroethidium，PD-MY 003
CAS号	104821-25-2
分子式	C21H21N3
分子量	315.41
结构式
纯度	≥98%
光谱特性	Ex/Em=370/420nm(活细胞细胞质内荧光检测)；Ex/Em=3535/610nm(活细胞染色质荧光检测)
溶解性	溶于DMSO(10mg/mL)、DMF、无水乙醇和氯仿(20mg/mL)

将冻干粉置于回温至少20min，加入适量高质量无水DMSO配制成5～10mM储存液（比如，5mg DHE加入1.58mL DMSO充分溶解即得到10mM储存液）。未用完的DMSO储存液请分装置于-20℃避光保存，最好置于惰性气体如氮气或氩气内。

• 本品易氧化，保存过程中尽量避免接触空气。需保存在氮气或氩气下，特别是溶液。
  
• 本品对光敏感，保存和操作过程中注意避光。
  
• 本品氧化后产生一定乙锭类化合物，毒性较大，请注意防护。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

用生理缓冲液如PBS,HBSS,HEPES等稀释储存液到5～20μM工作液，然后加入等体积工作液到细胞内，37℃孵育5～60min加载探针（一般孵育30min即可得到均匀染色的细胞），随后简单清洗后，用流式细胞仪或其他适当荧光检测仪器进行检测。